Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ACTR-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2): sc-418974-KO-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTR-I O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m2) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ACTR-I, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACTR-I Anticorpo (C-5): sc-374523
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTR-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) | sc-418974-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Acvr1 codifica o receptor de activina A tipo I (ACTR-I/ALK2), um receptor quinase de serina/treonina do tipo I pertencente à superfamília do TGF-β, que transduz sinais de ligantes BMP. Após a ligação do ligante e a ativação pelos receptores do tipo II, o ACTR-I fosforila SMAD1/5/9 para regular programas de transcrição que controlam o padrão embrionário, a diferenciação osteogénica e a homeostase dos tecidos. A sinalização dependente de ACVR1 integra-se com a MAPK e outras vias específicas do contexto para coordenar decisões de destino celular e respostas a morfogénios. A atividade desregulada de ACVR1 ou um desequilíbrio na via BMP está associada a fenótipos de esqueletogénese anormal e ossificação ectópica, tornando o Acvr1 um nó-chave para estudos mecanísticos em biologia do desenvolvimento e modelos de doenças musculoesqueléticas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACTR-I (m2) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Acvr1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Acvr1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Acvr1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACTR-I.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Acvr1 para a investigação da sinalização de ACTR-I, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Acvr1 críticos para a função ACTR-I
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Acvr1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ACTR-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ACTR-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Acvr1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ACTR-I Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ACTR-I (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Acvr1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Acvr1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.