Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ACTA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400003-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTA2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ACTA2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ACTA2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ACTA2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:α-Actin Anticorpo (1A4): sc-32251
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400003-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACTA2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400003-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACTA2 codifica a α-actina de músculo liso (ACTA2), uma proteína estrutural central dos filamentos contráteis, enriquecida em células musculares lisas vasculares e miofibroblastos. Ao polimerizar-se em fibras de stress de F-actina e ao interagir com motores de miosina, a ACTA2 sustenta a tensão do citoesqueleto, a dinâmica das adesões focais e programas de mecanotransdução que moldam a migração celular e a remodelação da matriz extracelular. A atividade da ACTA2 cruza-se com a sinalização RhoA/ROCK, com a diferenciação induzida por TGF-β e com o controlo transcricional SRF/MRTF da expressão de genes contráteis. A desregulação ou mutação de ACTA2 está implicada em disfunção do músculo liso vascular e em fenótipos de remodelação, incluindo risco de aneurisma/dissecção da aorta torácica, e é amplamente estudada em contextos de fibrose e contratilidade anormal.
ACTA2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ACTA2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ACTA2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ACTA2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ACTA2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.