Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ACSL5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-436628
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACSL5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ACSL5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACSL5 Anticorpo (A-2): sc-365478
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACSL5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-436628 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Acsl5 codifica a acil-CoA sintetase de cadeia longa, membro da família 5 (ACSL5), uma enzima associada às mitocôndrias e ao retículo endoplasmático que ativa ácidos graxos de cadeia longa em tioésteres de acil-CoA, direcionando-os para a β-oxidação, a síntese de triglicerídeos e a remodelação de fosfolipídios. Ao moldar a composição do pool de acil-CoA, a ACSL5 influencia a homeostase energética, a composição lipídica de membranas e vias de sinalização derivadas de lipídios ligadas ao metabolismo mitocondrial e ao estresse oxidativo. Em tecidos de camundongos com alta demanda metabólica, alterações na atividade da ACSL5 têm sido associadas a perturbações no uso de ácidos graxos e em vias sensíveis à insulina, reforçando sua relevância para estudos de desregulação metabólica e de fenótipos inflamatórios associados a lipídios.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACSL5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Acsl5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Acsl5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Acsl5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACSL5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Acsl5 para a investigação da sinalização de ACSL5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Acsl5 críticos para a função ACSL5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Acsl5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ACSL5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ACSL5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Acsl5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ACSL5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ACSL5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Acsl5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Acsl5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.