ACBD5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-417183

概要

ACBD5は、アシルCoA結合ドメインを含むペルオキシソームタンパク質をコードしており、長鎖アシルCoAエステルに結合し、ペルオキシソーム関連の脂質代謝を統括することで、細胞内の脂質取り扱いを支えます。ペルオキシソーム膜に局在し、ペルオキシソームと他オルガネラ間のコミュニケーションに寄与して、脂肪酸輸送や、脂質恒常性に関わるペルオキシソーム経路の構築・組織化に影響を与えます。ペルオキシソーム動態と脂質処理における役割を通じて、ACBD5は脂質組成の変化やオルガネラ機能不全に関連する細胞ストレス応答とも関係します。ペルオキシソーム依存的な脂質代謝の破綻は、神経変性、代謝バランスの乱れ、炎症性シグナル伝達といった文脈でしばしば研究されるため、ACBD5は作用機序の解明に向けた研究ターゲットとして有用です。

ACBD5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるACBD5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ACBD5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ACBD5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ACBD5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ACBD5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ACBD5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ACBD5の機能に不可欠なACBD5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ACBD5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ACBD5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびACBD5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ACBD5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ACBD5 HDRプラスミド（h）および ACBD5 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはACBD5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のACBD5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。