ACBD5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-417183

Visão geral

O ACBD5 codifica uma proteína peroxissomal contendo um domínio de ligação a acil-CoA, que auxilia o manuseio intracelular de lipídios ao se ligar a ésteres de acil-CoA de cadeia longa e coordenar o metabolismo lipídico associado aos peroxissomos. Ele se localiza na membrana do peroxissomo e contribui para a comunicação entre peroxissomos e outras organelas, influenciando o tráfego de ácidos graxos e a organização de vias peroxissomais envolvidas na homeostase lipídica. Por seu papel na dinâmica peroxissomal e no processamento de lipídios, o ACBD5 é relevante para respostas ao estresse celular ligadas a alterações na composição lipídica e à disfunção de organelas. A desregulação do metabolismo lipídico dependente de peroxissomos é frequentemente estudada no contexto de neurodegeneração, desequilíbrio metabólico e sinalização inflamatória, tornando o ACBD5 um alvo útil para investigações mecanísticas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACBD5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ACBD5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ACBD5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ACBD5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACBD5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ACBD5 para a investigação da sinalização de ACBD5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ACBD5 críticos para a função ACBD5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ACBD5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ACBD5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ACBD5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ACBD5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ACBD5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ACBD5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ACBD5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ACBD5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.