Plasmide Double Nickase (h) Abin-1: sc-418363-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Abin-1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Abin-1 Double Nickase (h) et le plasmide Abin-1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TNIP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Abin-1 Antibody (G-12): sc-376999
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Abin-1 | sc-418363-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Abin-1 | sc-418363-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TNIP1 code Abin-1 (inhibiteur de l’activation de NF-κB se liant à A20), un adaptateur se liant à l’ubiquitine qui module la signalisation inflammatoire en coordonnant des complexes dépendants de l’ubiquitine en aval de récepteurs tels que TNFR, les TLR et IL-1R. Abin-1 s’interface avec l’axe régulateur A20/TNFAIP3 afin de limiter l’activité des voies NF-κB et MAPK, influençant la production de cytokines, la survie cellulaire et les réponses au stress. Grâce à ses rôles dans l’édition de l’ubiquitine et l’arrêt des signaux, TNIP1 contribue à l’homéostasie de l’immunité innée et adaptative. Des altérations génétiques et d’expression de TNIP1 ont été associées à une dérégulation immunitaire et à des phénotypes inflammatoires, soulignant son intérêt pour l’étude de l’auto-immunité, de l’inflammation des barrières et de la biologie tumorale dépendante du contexte.
Abin-1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TNIP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TNIP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TNIP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TNIP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.