Abi-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-417534-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Abi-1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Abi-1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Abi-1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ABI1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Abi-1 Anticorpo (C-1): sc-398554
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Abi-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-417534-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Abi-1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-417534-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABI1 codifica a proteína adaptadora Abl interactor 1 (Abi-1), um componente central do complexo regulatório WAVE que conecta a sinalização de Rac à polimerização de actina mediada por Arp2/3. Por meio de interações com quinases ABL, entradas da via PI3K e sinalização associada a integrinas, a Abi-1 coordena o “ruffling” de membrana, a formação de lamelipódios, a endocitose e a dinâmica de adesão célula–célula ou célula–matriz. Alterações na expressão de ABI1 ou no “wiring” de sua rede têm sido associadas a uma remodelação desregulada do citoesqueleto e a desequilíbrios de sinalização em diversos contextos patológicos, incluindo fenótipos de migração e invasão relacionados ao câncer. Como proteína de ancoragem (scaffold), a Abi-1 funciona como um nó mecanístico para estudar como vias de receptores e de quinases convergem para a morfogênese dependente de actina e para o tráfego intracelular.
Abi-1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ABI1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ABI1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ABI1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ABI1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.