ABCG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401237

概要

ABCG1（ATP結合カセット輸送体サブファミリーGメンバー1）は、コレステロールおよびリン脂質の排出（エフラックス）を担うトランスポーターで、HDLへの脂質輸送を促進し、細胞膜の組成とステロール恒常性の維持に寄与します。LXR/RXRシグナル伝達の下流で機能し、マクロファージにおけるコレステロール処理、脂肪滴（リピッドドロップレット）の動態、ならびに骨髄系細胞の炎症トーンの調節に関与します。ABCG1活性の変化は、脂質代謝の破綻や免疫細胞活性化の異常と関連づけられており、動脈硬化の生物学、代謝性炎症、肺サーファクタントの恒常性の観点から重要です。ヒト細胞モデルでは、ABCG1は泡沫細胞形成、サイトカイン応答、ABCA1などのABCトランスポーターとのクロストークへの影響を評価する目的で、しばしば研究されています。

ABCG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるABCG1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ABCG1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ABCG1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ABCG1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ABCG1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ABCG1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ABCG1の機能に不可欠なABCG1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ABCG1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ABCG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびABCG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ABCG1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ABCG1 HDRプラスミド（h）および ABCG1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはABCG1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のABCG1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。