AAK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406073-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- AAK1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase AAK1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase AAK1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para AAK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:AAK1 Anticorpo (LW-M11): sc-134242
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
AAK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406073-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
AAK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406073-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
AAK1 (quinase 1 associada ao AP2) é uma quinase de serina/treonina que fosforila componentes do complexo adaptador AP2 para regular a endocitose mediada por clatrina e o tráfego de membranas. Ao coordenar a internalização de cargas e a reciclagem de receptores, a AAK1 influencia a dinâmica de sinalização de vias como EGFR e GPCRs e molda as respostas celulares a jusante. Ela também se integra a processos de triagem endossomal e formação de vesículas que afetam a captação de nutrientes, o ciclo de vesículas sinápticas e a sinalização imune inata. Alterações na atividade da AAK1 e no controle endocítico têm sido associadas à desregulação da sinalização e a fenótipos relevantes para a biologia do câncer e para contextos de pesquisa em doenças neurológicas e infecciosas.
AAK1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus AAK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de AAK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função AAK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com AAK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.