A-Myb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404328

Visão geral

MYBL1 codifica o fator de transcrição A-Myb, uma proteína de ligação ao DNA específica de sequência que regula programas de expressão gênica ligados à progressão do ciclo celular, à diferenciação e à proliferação restrita a linhagens. O A-Myb atua em redes transcricionais que controlam processos associados à cromatina e à sinalização de checkpoints, influenciando a expressão de genes envolvidos na replicação do DNA e na entrada em mitose. A atividade desregulada de MYBL1 ou um contexto regulatório alterado têm sido associados a estados proliferativos aberrantes e a programas transcricionais oncogênicos em múltiplos tecidos. Como regulador transcricional nuclear, o A-Myb é frequentemente estudado por seu papel em acoplar sinais do desenvolvimento a saídas transcricionais coordenadas.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO A-Myb (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MYBL1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MYBL1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MYBL1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína A-Myb.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MYBL1 para a investigação da sinalização de A-Myb, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MYBL1 críticos para a função A-Myb
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MYBL1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo A-Myb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo A-Myb Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MYBL1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo A-Myb Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR A-Myb (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MYBL1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MYBL1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.