Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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βPAK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422108
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- βPAK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico βPAK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
βPAK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422108 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Pak3 codifica a βPAK (quinase 3 ativada por p21), uma quinase de serina/treonina ativada a jusante das GTPases da família Rho RAC1 e CDC42. A βPAK coordena a remodelação do citoesqueleto de actina, o crescimento de neuritos e a sinalização sináptica por meio de vias que se cruzam com a sinalização MAPK/ERK, com a dinâmica de adesão celular e com a plasticidade neuronal dependente de atividade. Em camundongos, a função de Pak3 é particularmente relevante para estudos do desenvolvimento do sistema nervoso e do funcionamento de circuitos, nos quais alterações na sinalização de PAK podem afetar a morfologia das espinhas dendríticas e a conectividade sináptica. A desregulação da sinalização da família PAK tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e cognitivos, sustentando seu uso em estudos mecanísticos de sinalização neuronal e controle do citoesqueleto.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO βPAK (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Pak3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Pak3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Pak3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína βPAK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Pak3 para a investigação da sinalização de βPAK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Pak3 críticos para a função βPAK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Pak3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo βPAK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo βPAK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Pak3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo βPAK Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR βPAK (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Pak3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Pak3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.