Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
αENaC Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-422825-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- αENaCO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase αENaC (m) e o Plasmídeo Double Nickase αENaC (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Scnn1a. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
αENaC Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-422825-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
αENaC Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-422825-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Scnn1a codifica a subunidade alfa do canal epitelial de sódio do camundongo (αENaC), um componente central formador do poro do ENaC que medeia a absorção de Na⁺ sensível à amilorida através de epitélios. O fluxo de sódio dependente de αENaC contribui para o transporte iônico transepitelial, o movimento osmótico de água e a regulação do potencial de membrana no rim, nas vias aéreas e em outros tecidos epiteliais. A atividade do ENaC é rigidamente controlada por processamento proteolítico e renovação dependente de ubiquitina, incluindo modulação por NEDD4L e pela sinalização de SGK1 em resposta a hormônios como a aldosterona. A disfunção do ENaC está associada a alterações na homeostase de sal e fluidos e é amplamente estudada em modelos de hidratação da superfície das vias aéreas pulmonares e de manuseio renal de sódio.
αENaC O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Scnn1a em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Scnn1a. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Scnn1a. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Scnn1a interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.