9030612M13Rik Activadores

Activadores 9030612M13Rik comunes incluyen, pero no se limitan a la forskolina CAS 66575-29-9, Ionomycin CAS 56092-82-1, PMA CAS 16561-29-8, clorhidrato de isoproterenol CAS 51-30-9 y la histamina, base libre CAS 51-45-6.

Activadores de 9030612M13Rik denota una categoría de agentes químicos que pueden aumentar la actividad del gen 9030612M13Rik. La fase inicial en la identificación de estos activadores implica el uso de cribado de alto rendimiento (HTS), un método que facilita el examen de una multitud de compuestos por su capacidad para modular la expresión génica. Para ello se utiliza un ensayo de gen reportero, en el que un gen reportero detectable -que suele codificar una proteína fluorescente o luminiscente- se coloca bajo el control del promotor del gen 9030612M13Rik. Cuando las células que albergan esta construcción se exponen a diversas sustancias químicas, las que pueden activar el promotor desencadenan un aumento de la producción del gen informador. A continuación se mide cuantitativamente el aumento resultante de fluorescencia o luminiscencia. Los compuestos que provocan sistemáticamente un aumento significativo de la señal del gen informador se consideran posibles activadores del gen 9030612M13Rik y se seleccionan para un análisis más detallado que confirme su actividad.

El segundo paso de este proceso consiste en validar la capacidad de estos compuestos para regular al alza el gen 9030612M13Rik a nivel del ARNm y de las proteínas. Se emplea la PCR cuantitativa (qPCR) para medir los niveles de ARNm de 9030612M13Rik tras la interacción con los compuestos. Un aumento del ARNm detectado por qPCR es indicativo de una transcripción elevada, lo que sugiere que el compuesto puede aumentar la expresión génica a nivel transcripcional. Paralelamente, se utiliza el análisis Western blot para determinar si el aumento de los niveles de ARNm se correlaciona con un aumento del producto proteico del gen 9030612M13Rik. Esta técnica implica la separación de proteínas mediante electroforesis en gel, su transferencia a una membrana y el posterior sondeo con anticuerpos específicos contra la proteína 9030612M13Rik. Un aumento de la intensidad de la banda de proteína, en relación con las muestras de control, confirmaría que el compuesto puede efectivamente provocar un aumento del nivel de proteína.