ZNF526 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431684

概要

Zfp526 は、マウスのジンクフィンガータンパク質 ZNF526 をコードしており、制御配列との C2H2 型ジンクフィンガーを介した相互作用を通じて転写調節に関与すると考えられている、核内の DNA 結合因子（推定）です。多くの KRAB 関連ジンクフィンガータンパク質と同様に、ZNF526 はクロマチン依存的な遺伝子サイレンシングや、細胞状態および分化に影響する系譜特異的な転写プログラムの調節に関与すると予想されます。ジンクフィンガー型転写因子の発現変化や制御異常は、エピジェネティック制御ネットワークや下流のシグナル伝達経路を攪乱し得るため、発生表現型や疾患に関連する転写バランスの破綻に関わる遺伝子制御機構を研究する枠組みを提供します。Zfp526 の機能解析は、転写因子とクロマチンの接点がマウスモデル系における遺伝子発現および細胞恒常性をどのように形成するかを探る研究を後押しします。

ZNF526 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるZfp526遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Zfp526内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Zfp526のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZNF526タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZNF526シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Zfp526欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZNF526の機能に不可欠なZfp526エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Zfp526ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZNF526 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびZNF526 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Zfp526遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZNF526 HDRプラスミド（m）および ZNF526 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZfp526ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZfp526標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。