Z39Ig Lentiviral Activation Particles (h): sc-404067-LAC

VSIG4 (Z39Ig) kodiert einen zur B7-Familie verwandten Rezeptor aus der Immunglobulin-Superfamilie, der vorwiegend auf gewebsständigen Makrophagen exprimiert wird, einschließlich Kupffer-Zellen. Das Protein fungiert als Komplementrezeptor für C3-Fragmente und kann die angeborene Immunaktivierung modulieren, indem es die Phagozytose beeinflusst und T‑Zell-Antworten dämpft. Dadurch verknüpft es die Komplementbiologie mit Antigenpräsentation und einer immuncheckpoint-ähnlichen Signalgebung. Die VSIG4-Aktivität überschneidet sich mit Signalwegen, die den Entzündungszustand und die Polarisation von Makrophagen im Gewebe prägen. Eine veränderte VSIG4-Expression wurde mit Phänotypen der Immunflucht und makrophagengetriebener Entzündung in Kontexten wie Krebs, Lebererkrankungen und fibrotischem Umbau in Verbindung gebracht, was seinen Einsatz als Marker und Regulator in der immunologischen Forschung unterstützt.

Z39Ig Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente VSIG4-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Z39Ig Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der VSIG4-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Z39Ig-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen VSIG4-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.