XBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400131-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- XBP1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase XBP1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase XBP1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para XBP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:XBP1 Anticorpo (F-4): sc-8015
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
XBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400131-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
XBP1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400131-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
XBP1 (proteína 1 de ligação ao X-box) é um fator de transcrição do tipo zíper básico de leucina que atua como um efetor central da resposta a proteínas mal dobradas (UPR), particularmente a jusante da sinalização de estresse do retículo endoplasmático (RE) por meio do splicing não convencional mediado por IRE1. A isoforma de XBP1 resultante do splicing ativa programas transcricionais que expandem a capacidade do RE, promovem o dobramento e a secreção de proteínas e coordenam a proteostase com o metabolismo lipídico e a diferenciação celular. A atividade de XBP1 está intimamente ligada à função de células secretoras em linhagens imunes e endócrinas e influencia a sinalização inflamatória e a adaptação metabólica sob estresse. A desregulação de vias dependentes de XBP1 tem sido associada a condições envolvendo estresse crônico do RE, incluindo a biologia do câncer, mecanismos de doenças metabólicas e distúrbios imunomediados, tornando-o um nó amplamente utilizado para estudar circuitos de adaptação ao estresse.
XBP1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus XBP1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de XBP1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função XBP1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com XBP1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.