VPS51 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-410709

개요

VPS51은 엔도솜에서 트랜스-골지 네트워크(TGN)로의 역행 수송을 매개하는 골지 연관 역행 단백질(GARP) 테더링 복합체의 핵심 소단위를 암호화합니다. VPS51은 TGN에서 소포 포획과 SNARE 의존적 융합을 촉진함으로써 골지 구조의 유지를 돕고, 분류 수용체와 화물 단백질의 적절한 재활용을 지원합니다. GARP 기능이 교란되면 엔도리소좀 항상성, 단백질 분류, 당화 의존적 성숙 경로가 흐트러지며, 그 결과 세포 스트레스 반응에도 하위 영향이 나타날 수 있습니다. 역행 수송의 변화는 막 수송의 무결성이 수용체 가용성과 신호 출력에 영향을 미치는 신경생물학, 면역 신호전달, 증식성 표현형 모델과 관련이 있습니다.

VPS51 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 VPS51 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 VPS51 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 VPS51의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 VPS51 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 VPS51 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 VPS51 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• VPS51 기능에 중요한 VPS51 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 VPS51 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• VPS51 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 VPS51 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 VPS51 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  VPS51 HDR 플라스미드 (h) 및 VPS51 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 VPS51 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 VPS51 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.