Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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VHR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405733
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VHR O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico VHR, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VHR Anticorpo (F-2): sc-374161
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VHR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405733 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A fosfatase de proteínas de dupla especificidade 3 (DUSP3), também conhecida como VHR, é uma fosfatase atípica de dupla especificidade que desfosforila resíduos de fosfotirosina e de fosfoserina/treonina em quinases MAP. A VHR modula a dinâmica da sinalização MAPK/ERK e contribui para o controle da progressão do ciclo celular, das respostas ao estresse e da terminação de sinais a jusante de estímulos de fatores de crescimento e de sinais relacionados ao sistema imune. Ao ajustar programas transcricionais dependentes de fosforilação, a DUSP3 influencia fenótipos de proliferação e diferenciação em células humanas. A atividade de fosfatases desregulada e o controle alterado da via MAPK são frequentemente implicados na biologia do câncer e na sinalização inflamatória, tornando a DUSP3 um alvo útil para estudos mecanísticos de fosforregulação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VHR (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DUSP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DUSP3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DUSP3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VHR.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DUSP3 para a investigação da sinalização de VHR, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DUSP3 críticos para a função VHR
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DUSP3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo VHR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo VHR Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DUSP3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo VHR Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR VHR (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DUSP3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DUSP3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.