VE-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400063-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VE-cadherinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase VE-cadherin (h) e o Plasmídeo Double Nickase VE-cadherin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDH5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VE-cadherin Anticorpo (F-8): sc-9989
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VE-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400063-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VE-cadherin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400063-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDH5 codifica a VE-caderina, uma proteína de junção aderente específica do endotélio que medeia a adesão homofílica dependente de Ca²⁺ para manter a integridade da barreira vascular. Por meio de interações com cateninas e da ligação ao citoesqueleto de actina, a VE-caderina coordena a remodelação das junções e a sinalização dependente de contato que moldam a angiogênese, a polarização endotelial e a transmigração de leucócitos. A função da VE-caderina se cruza com vias que controlam a permeabilidade e a mecanotransdução, incluindo a regulação da estabilidade das junções a jusante da sinalização por VEGF. A atividade ou expressão desregulada de CDH5 está associada à disfunção endotelial e ao remodelamento vascular patológico observado em inflamação, edema e angiogênese associada a tumores.
VE-cadherin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDH5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDH5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDH5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDH5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.