Vav CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423655

개요

Vav1은 조혈계 특이적 구아닌 뉴클레오타이드 교환 인자(GEF)인 Vav를 암호화하며, Rac1과 Cdc42 같은 Rho 계열 GTPase를 활성화해 세포골격 재구성과 신호 전달을 조율합니다. 마우스 면역세포에서 Vav1은 항원 수용체와 Fc 수용체 하위의 신호를 통합하여 티로신 키나아제 경로를 MAPK, NF-κB 및 칼슘 의존적 전사 프로그램과 연결합니다. 이러한 작용은 T 세포의 발달, 활성화, 이동을 형성하고, 림프구 계열 전반에서 항원 유도 효과기 기능에도 영향을 미칩니다. Vav1 신호의 이상 조절은 면역 기능 이상 및 혈액질환 모델에서의 종양성 신호 맥락과 연관되어 왔으며, 백혈구 신호 네트워크의 기전 연구에서 핵심 노드로 여겨집니다.

Vav CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Vav1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Vav1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Vav1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Vav 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Vav 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Vav1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Vav 기능에 중요한 Vav1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Vav1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Vav CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Vav CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Vav1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Vav HDR 플라스미드 (m) 및 Vav HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Vav1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Vav1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.