USP3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404849-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- USP3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase USP3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase USP3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para USP3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:USP3 Anticorpo (8L8): sc-135597
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
USP3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404849-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404849-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O USP3 humano codifica uma protease específica de ubiquitina que reverte a ubiquitinação para regular a estabilidade proteica e a fidelidade da sinalização. O USP3 é mais conhecido por desubiquitinar substratos associados à cromatina e coordenar programas de manutenção do genoma, ligando a sinalização por ubiquitina às respostas ao estresse de replicação do DNA e ao reparo de danos no DNA. Por meio dessas atividades, o USP3 influencia a progressão do ciclo celular e a dinâmica da cromatina, processos frequentemente perturbados em distúrbios proliferativos e na biologia tumoral. Alterações na expressão ou na função do USP3 têm sido associadas à desregulação da homeostase da ubiquitina e a fenótipos de instabilidade genômica relevantes para estudos mecanísticos em câncer e em outras doenças que envolvem reparo de DNA comprometido.
USP3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus USP3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de USP3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função USP3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com USP3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.