USP28 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407678-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- USP28O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase USP28 (h) e o Plasmídeo Double Nickase USP28 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para USP28. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
USP28 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407678-NIC | 20 µg | $410.00 |
USP28 codifica uma protease específica de ubiquitina que contrabalança as ubiquitina-ligases ao remover cadeias de poliubiquitina de proteínas substrato, regulando assim a sua estabilidade e o resultado da sinalização. Em células humanas, a USP28 tem sido associada ao controlo do turnover proteico em vias que regulam as respostas a danos no DNA, processos associados à cromatina e a progressão do ciclo celular, incluindo a modulação de programas dependentes de MYC por meio da desubiquitinação de fatores reguladores-chave. Ao moldar a sinalização por ubiquitina, a USP28 pode influenciar a tolerância ao stress de replicação e a sinalização de checkpoints, tornando-a relevante para estudos de integridade genómica e transformação oncogénica. Alterações na atividade ou na expressão de USP28 têm sido observadas em múltiplos contextos tumorais, apoiando a sua utilidade como alvo para investigação mecanística em biologia do cancro.
USP28 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus USP28 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de USP28. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função USP28. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com USP28 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.