Plásmido Doble Nickase (m) USP2: sc-424700-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)USP2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa USP2 (m) y el plásmido de doble nickasa USP2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Usp2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) USP2 | sc-424700-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) USP2 | sc-424700-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Usp2 codifica la peptidasa específica de ubiquitina 2 (USP2), una enzima desubiquitinante que revierte el recambio proteico dependiente de ubiquitina y modula la estabilidad de sus sustratos en múltiples programas celulares. USP2 se ha relacionado con la regulación de la progresión del ciclo celular, la apoptosis y la señalización en respuesta al estrés, incluida la interacción (crosstalk) con vías inflamatorias y metabólicas que dependen de una edición controlada de ubiquitina. Al determinar la vida media de las proteínas y la amplitud de la señalización, USP2 influye en las salidas transcripcionales y en la homeostasis celular de manera dependiente del contexto. La actividad o la expresión desregulada de USP2 se ha asociado con fenotipos relevantes para enfermedad, como proliferación alterada, desequilibrio en la señalización inmunitaria y disfunción metabólica, lo que respalda su uso como nodo mecanístico en estudios de vías.
USP2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Usp2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Usp2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Usp2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Usp2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.