Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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USP14 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403167-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- USP14O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase USP14 (h) e o Plasmídeo Double Nickase USP14 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para USP14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:USP14 Anticorpo (F-4): sc-398009
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
USP14 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403167-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP14 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403167-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP14 codifica uma protease específica de ubiquitina que se associa ao proteassoma 26S e “edita” cadeias de ubiquitina em substratos, regulando assim a degradação proteassomal e a homeostase de ubiquitina em células humanas. Ao remover ubiquitina de proteínas conjugadas, a USP14 influencia o controlo de qualidade proteica, as respostas ao stress celular e vias de sinalização ligadas à proteostase, incluindo processos que afetam a progressão do ciclo celular e a apoptose. Alterações na atividade da USP14 têm sido estudadas no contexto de disfunção do proteassoma e de sinalização aberrante por ubiquitina, mecanismos frequentemente implicados na biologia do cancro e na neurodegeneração. Como desubiquitinase associada ao proteassoma, a USP14 também é relevante para investigar como a dinâmica da ubiquitina molda o processamento de antigénios e a renovação mais ampla de proteínas relacionada com a imunidade.
USP14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus USP14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de USP14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função USP14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com USP14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.