USP1 Plasmide Double Nickase (h): sc-406837-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- USP1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il USP1 Double Nickase Plasmid (h) e il USP1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira USP1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
USP1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-406837-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
USP1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-406837-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
USP1 umano codifica un enzima deubiquitinante che regola la stabilità del genoma invertendo eventi di monoubiquitinazione all’interno della via di riparazione del DNA dell’anemia di Fanconi, inclusa la deubiquitinazione di FANCD2/FANCI. In coordinamento con UAF1, USP1 modula la segnalazione del danno al DNA durante la fase S e influenza la scelta e l’efficienza di meccanismi di riparazione quali la ricombinazione omologa e la sintesi del DNA per translesione. L’attività di USP1 incide anche sulle risposte allo stress replicativo e sul controllo dei checkpoint del ciclo cellulare, regolando finemente il turnover proteico dipendente dall’ubiquitina. Una funzione deregolata di USP1 è stata associata ad alterata capacità di riparazione del DNA, instabilità cromosomica e fenotipi oncogenici in molteplici contesti tumorali, rendendolo un bersaglio frequente negli studi meccanicistici sul mantenimento del genoma.
USP1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus USP1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di USP1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di USP1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con USP1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.