URE-B1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404890-LAC

HUWE1 は URE-B1 をコードしており、URE-B1 は HECT ドメインを持つ E3 ユビキチンリガーゼで、複数のシグナル伝達因子や DNA 損傷応答因子のユビキチン依存的な分解回転を触媒することで、プロテオスタシスを制御する。ユビキチン化の制御を介して、HUWE1 はアポトーシス、細胞周期の進行、ゲノム安定性に影響を及ぼし、p53 シグナル伝達やストレス応答性の転写プログラムに関連する経路と統合的に機能する。HUWE1 の活性または発現の異常は、さまざまな疾患状況において増殖の変化や DNA 修復不全と関連づけられており、ユビキチン媒介シグナル伝達と転写恒常性を研究する上での重要な結節点となっている。幅広い基質ネットワークを有することから、ユビキチン動態が細胞の運命決定をどのように形作るかを解明するための機序的研究を支えている。

URE-B1 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なHUWE1の発現上昇を可能にします。

URE-B1 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、HUWE1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性URE-B1の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のHUWE1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。