UQCRC1 Double Nickaseプラスミド (h): sc-404435-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- UQCRC1 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- UQCRC1ダブルニカースプラスミド（h）およびUQCRC1ダブルニカースプラスミド（h2）は、UQCRC1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
UQCRC1 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-404435-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UQCRC1 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-404435-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UQCRC1は、ミトコンドリア内膜に存在する複合体III（ユビキノール‐シトクロムc還元酵素）の中核的な構造サブユニットをコードしており、呼吸鎖における電子伝達を支えるとともに、酸化的リン酸化のためのプロトン駆動力の生成に寄与します。複合体IIIの組み立てと機能を安定化させることで、UQCRC1は細胞内ATP産生、活性酸素種（ROS）のバランス、ミトコンドリア膜電位に影響を与えます。複合体III構成要素の異常は代謝恒常性やストレスシグナル伝達を乱し得るため、UQCRC1はバイオエネルゲティクス、アポトーシス感受性、ミトコンドリア品質管理を制御する経路と関連づけられます。ミトコンドリア呼吸の変化や複合体IIIの完全性の破綻は、神経変性、心代謝機能障害、がん細胞の代謝再プログラム化に関する研究で繰り返し観察される特徴であり、UQCRC1はミトコンドリア生物学研究における有用な標的となります。
UQCRC1 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における UQCRC1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、UQCRC1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、UQCRC1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、UQCRC1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。