UGT2B15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405610

概要

UGT2B15 は、内因性ホルモンや多様な外来性化学物質（ゼノバイオティクス）に対する第II相反応であるグルクロン酸抱合を触媒し、排泄に向けてそれらの溶解性を高めるヒトUDP-グルクロン酸転移酵素をコードします。UGT2ファミリーに属する小胞体膜酵素として、肝および肝外組織での代謝クリアランスに寄与し、抱合による不活化を介して生理活性ステロイドの細胞内曝露量を規定します。UGT2B15 活性の変動は、アンドロゲンをはじめとするステロイドの恒常性を変化させ、内分泌シグナル伝達ネットワークや下流の転写プログラムに影響を及ぼし得ます。発現変動や多型は、ホルモン依存性がんとの関連や、薬物代謝および毒性表現型における個体差の文脈で検討されてきました。

UGT2B15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるUGT2B15遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、UGT2B15内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、UGT2B15のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、UGT2B15タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、UGT2B15シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、UGT2B15欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• UGT2B15の機能に不可欠なUGT2B15エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、UGT2B15ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• UGT2B15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびUGT2B15 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、UGT2B15遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  UGT2B15 HDRプラスミド（h）および UGT2B15 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUGT2B15ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUGT2B15標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。