UGT1A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423602

概要

マウスのUgt1a2は、UDP-グルクuronosyltransferase 1A2（UGT1A2）をコードしており、多様な内因性代謝物および外来性化学物質（ゼノバイオティクス）のグルクロン酸抱合（グルクロン酸化）を触媒する、ミクロソーム局在の第II相抱合酵素です。UGT1A2は、親油性基質にグルクロン酸を転移することで溶解性を高め、肝臓および肝外の解毒経路を介した排泄・クリアランスを促進します。Ugt1a2の活性は、化学物質の体内動態、酸化ストレス応答、ならびにシトクロムP450依存的代謝との相互作用を調節する、より広範なUGT1A依存性ネットワークの一部として機能します。UGT介在性抱合の遺伝学的または実験的な撹乱は、薬物動態の変化、化学傷害への感受性、そしてマウス疾患モデルにおける代謝関連表現型の研究において重要です。

UGT1A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるUgt1a2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ugt1a2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ugt1a2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、UGT1A2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、UGT1A2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ugt1a2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• UGT1A2の機能に不可欠なUgt1a2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ugt1a2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• UGT1A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびUGT1A2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ugt1a2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  UGT1A2 HDRプラスミド（m）および UGT1A2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUgt1a2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUgt1a2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。