Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
UFD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403304-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UFD1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UFD1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase UFD1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UFD1L. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UFD1 Anticorpo (B-7): sc-377265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UFD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403304-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UFD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403304-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UFD1L codifica a UFD1, um componente central do complexo UFD1–NPL4, que coopera com a ATPase AAA+ p97/VCP para extrair substratos poliubiquitinados de membranas e de assemblies macromoleculares, direcionando-os para degradação pelo proteassoma. Esse eixo é fundamental para a degradação associada ao retículo endoplasmático (ERAD), o controle de qualidade proteica e a renovação dependente de ubiquitina durante a progressão do ciclo celular e as respostas a danos no DNA. Ao regular a remoção de complexos proteicos mal dobrados ou estagnados, a UFD1 sustenta a proteostase e vias de adaptação ao estresse que influenciam a viabilidade em células de rápida proliferação. A regulação alterada da via p97/VCP–UFD1/NPL4 tem sido associada a desequilíbrio de proteostase e a defeitos na manutenção do genoma, relevantes para estudos de fenótipos celulares ligados à neurodegeneração e ao câncer.
UFD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UFD1L em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UFD1L. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UFD1L. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UFD1L interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.