Ufc1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409943

Visão geral

UFC1 codifica a enzima conjugadora do tipo E2 Ufc1, um componente central do sistema de conjugação UFM1 (modificador 1 com dobra semelhante à ubiquitina), que promove a ufmilação de substratos proteicos. Essa via coordena a proteostase no retículo endoplasmático, a sinalização de estresse do RE e processos de controle de qualidade ligados à função da via secretória, com papéis descritos no controle de qualidade associado ao ribossomo e na homeostase celular. A desregulação de componentes da ufmilação, incluindo UFC1, tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento, defeitos hematopoéticos e adaptação ao estresse celular relacionada ao câncer em modelos experimentais, reforçando sua relevância para a biologia das doenças. Assim, UFC1 é frequentemente estudado em contextos nos quais a função do RE, a resiliência ao estresse e a manutenção do proteoma influenciam decisões de destino celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Ufc1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene UFC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do UFC1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do UFC1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Ufc1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de UFC1 para a investigação da sinalização de Ufc1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) UFC1 críticos para a função Ufc1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos UFC1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Ufc1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Ufc1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus UFC1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Ufc1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Ufc1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia UFC1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo UFC1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.