UCP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423597

概要

Ucp3 はミトコンドリア脱共役タンパク質3（UCP3）をコードしており、UCP3 は内膜に存在するキャリアとして、酸化的リン酸化におけるプロトンリークと共役効率を調節します。マウスの骨格筋および褐色脂肪組織では、UCP3 は脂肪酸利用、ミトコンドリア由来の活性酸素種（ROS）の調節、ならびに栄養利用状況の変化に応じた適応的な熱産生応答に関連しています。ミトコンドリアのバイオエネルギー代謝と脂質の取り扱いに影響を与えることで、UCP3 はエネルギーホメオスタシス、インスリン感受性、酸化ストレスに関わる経路に関与します。Ucp3 の発現や活性の変化は、肥満、メタボリックシンドローム、筋の代謝適応のモデルにおいてしばしば検討されます。

UCP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるUcp3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ucp3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ucp3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、UCP3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、UCP3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ucp3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• UCP3の機能に不可欠なUcp3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ucp3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• UCP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびUCP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ucp3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  UCP3 HDRプラスミド（m）および UCP3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUcp3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUcp3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。