UCP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400866

概要

脱共役タンパク質3（UCP3）はミトコンドリア内膜に存在するキャリアタンパク質で、主に骨格筋で発現し、酸化的リン酸化の効率やプロトンリークの調節に関与すると考えられています。ミトコンドリア膜電位や呼吸を調整することで、UCP3は脂肪酸酸化、レドックスバランス、高い代謝需要下における活性酸素種（ROS）の制御に影響を及ぼします。UCP3の活性は、栄養状態や運動に対する適応応答を含む、エネルギーホメオスタシス、脂質代謝、ミトコンドリア品質管理を司る経路とも交差します。UCP3の発現や機能の変化は、インスリン感受性、肥満関連形質、ならびに心代謝領域におけるミトコンドリア機能障害と関連する代謝表現型と結び付けて報告されています。

UCP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるUCP3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、UCP3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、UCP3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、UCP3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、UCP3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、UCP3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• UCP3の機能に不可欠なUCP3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、UCP3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• UCP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびUCP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、UCP3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  UCP3 HDRプラスミド（h）および UCP3 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはUCP3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のUCP3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。