Type I 5-phosphatase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410836-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Type I 5-phosphataseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Type I 5-phosphatase (h) e o Plasmídeo Double Nickase Type I 5-phosphatase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para INPP5A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Type I 5-phosphatase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410836-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Type I 5-phosphatase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410836-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
INPP5A codifica a 5-fosfatase tipo I de polifosfato de inositol, uma enzima citosólica que hidrolisa o fosfato na posição 5 do inositol 1,4,5-trifosfato (IP3) e de fosfatos de inositol relacionados, para encerrar a sinalização por segundos mensageiros. Ao limitar a mobilização de cálcio dependente de IP3 a partir do retículo endoplasmático, a INPP5A modula processos regulados por Ca2+, incluindo secreção, excitabilidade e respostas transcricionais dependentes da atividade. Esse turnover de fosfoinositídeos/fosfatos de inositol se cruza com a sinalização ligada à PI3K e com um controle homeostático mais amplo das respostas celulares ao estresse. Alterações na expressão ou na função de INPP5A têm sido implicadas em desregulação da sinalização de cálcio e são estudadas no contexto da neurobiologia e da reprogramação de vias de sinalização associadas ao câncer.
Type I 5-phosphatase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus INPP5A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de INPP5A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função INPP5A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com INPP5A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.