TUSC3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405571-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TUSC3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TUSC3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TUSC3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TUSC3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TUSC3 Anticorpo (D-9): sc-390566
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TUSC3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405571-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TUSC3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405571-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUSC3 (candidato a supressor tumoral 3) codifica uma proteína de membrana do retículo endoplasmático que atua como subunidade do complexo oligosacariltransferase (OST), dando suporte à glicosilação N-ligada e ao controle de qualidade proteico. Ao influenciar o dobramento de glicoproteínas e a homeostase do RE, o TUSC3 contribui para vias de proteostase que se cruzam com a sinalização de estresse do RE e programas de diferenciação celular. A expressão alterada de TUSC3 ou a perda de função têm sido associadas à glicosilação desregulada e foram relatadas em estudos sobre fenótipos do neurodesenvolvimento e biologia do câncer, tornando-o um alvo relevante para pesquisas mecanísticas. Em células humanas, a perturbação de TUSC3 é comumente utilizada para investigar como a glicosilação associada ao RE impacta a maturação de receptores, a função da via secretória e respostas adaptativas ao estresse.
TUSC3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TUSC3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TUSC3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TUSC3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TUSC3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.