Trx CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423563

개요

마우스 Txn1은 티오레독신(Trx)을 암호화하는 유전자이며, Trx는 표적 단백질의 이황화 결합을 환원하는 반응을 촉매함으로써 세포의 산화환원 항상성을 유지하는 보존된 산화환원효소입니다. Trx는 티오레독신 환원효소와 NADPH와 함께 티오레독신 시스템을 이루어 MAPK 및 NF-κB 경로를 포함한 산화환원 민감성 신호전달을 조절하고, 대사와 염증 과정에서 생성되는 활성산소종(ROS)을 완충합니다. 또한 단백질 접힘 조절, 리보뉴클레오타이드 환원효소를 통한 DNA 합성 지원, 아폽토시스와 오토파지의 조절을 통해 Txn1은 전반적으로 세포 스트레스 적응에 폭넓게 기여합니다. 티오레독신 활성의 이상 조절은 신경퇴행, 대사 기능장애, 염증성 병리와 관련된 산화 스트레스 표현형과 자주 연관되므로, Txn1은 산화환원에 의해 구동되는 질병 과정의 기전을 연구하는 데 유용한 핵심 노드입니다.

Trx CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Txn1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Txn1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Txn1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Trx 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Trx 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Txn1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Trx 기능에 중요한 Txn1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Txn1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Trx CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Trx CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Txn1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Trx HDR 플라스미드 (m) 및 Trx HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Txn1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Txn1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.