TrkB Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400142-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TrkBO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TrkB (h) e o Plasmídeo Double Nickase TrkB (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NTRK2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TrkB Anticorpo (H-8): sc-136990
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TrkB Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400142-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TrkB Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400142-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NTRK2 codifica a tirosina-quinase receptora TrkB, um receptor de alta afinidade para BDNF e NT-4/5 que regula a diferenciação neuronal, a plasticidade sináptica e a sobrevivência dependente de atividade. A ligação do ligante induz a autofosforilação de TrkB e ativa as vias de sinalização PI3K–AKT, RAS–MAPK/ERK e PLCγ, controlando programas transcricionais, remodelamento do citoesqueleto e processos dependentes de cálcio. Na biologia humana, a desregulação da sinalização de TrkB tem sido implicada em fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos e também é estudada em contextos oncogênicos, nos quais a atividade alterada do receptor pode afetar proliferação e migração. Como um nó de via que integra sinais de neurotrofinas com respostas de crescimento e estresse, TrkB é amplamente utilizado em estudos mecanísticos de função de circuitos, decisões de destino celular e transdução de sinais.
TrkB O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NTRK2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NTRK2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NTRK2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NTRK2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.