TRIP12 Plasmide Double Nickase (h): sc-403860-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TRIP12 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TRIP12 Double Nickase Plasmid (h) e il TRIP12 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira TRIP12. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TRIP12 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403860-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRIP12 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-403860-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIP12 codifica una ligasi E3 ubiquitina-proteina (nota anche come ULF) che promuove l’ubiquitinazione dei substrati e la loro degradazione tramite il proteasoma, contribuendo così a modellare l’omeostasi proteica e l’ampiezza dei segnali cellulari. È implicata nelle risposte al danno al DNA e nel controllo del ciclo cellulare attraverso la regolazione di vie chiave di checkpoint e di soppressione tumorale, inclusa la modulazione dell’attività dell’asse p14ARF–MDM2–p53. Influenzando il controllo qualità dipendente dall’ubiquitina, TRIP12 contribuisce alla stabilità del genoma e all’adattamento allo stress cellulare. Alterazioni della funzione o dell’espressione di TRIP12 sono state associate a proliferazione disregolata e a fenotipi di neurosviluppo, rendendolo un bersaglio rilevante per studi meccanicistici in biologia del cancro e in modelli neuronali.
TRIP12 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus TRIP12 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di TRIP12. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di TRIP12. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con TRIP12 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.