TRAF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423495
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRAF4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TRAF4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRAF4 Anticorpo (B-9): sc-390232
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRAF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423495 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O fator associado ao receptor do fator de necrose tumoral 4 (TRAF4), codificado pelo gene Traf4 de camundongo, é uma proteína adaptadora e ligase E3 de ubiquitina que conecta a sinalização proximal ao receptor a redes downstream de quinases e de regulação transcricional. O TRAF4 participa da regulação das vias de sinalização NF-κB e MAPK e tem sido associado à dinâmica do citoesqueleto, à polaridade celular e a processos relacionados à barreira epitelial por meio de interações dependentes do contexto com complexos de membrana e de junção. Em compartimentos imunes e epiteliais, a atividade de Traf4 pode influenciar a amplitude da sinalização inflamatória e as respostas celulares ao estresse. Vias associadas ao TRAF4 desreguladas têm sido estudadas em relação à biologia tumoral, ao remodelamento tecidual e a mecanismos de doenças inflamatórias, tornando o Traf4 um alvo útil para dissecar vias em modelos murinos e sistemas celulares.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TRAF4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Traf4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Traf4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Traf4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TRAF4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Traf4 para a investigação da sinalização de TRAF4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Traf4 críticos para a função TRAF4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Traf4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TRAF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TRAF4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Traf4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TRAF4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TRAF4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Traf4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Traf4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.