TRAF3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400473-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRAF3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRAF3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRAF3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TRAF3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TRAF3 Anticorpo (G-6): sc-6933
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRAF3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400473-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRAF3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400473-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRAF3 (fator associado ao receptor de TNF 3) é uma proteína adaptadora e uma ligase E3 de ubiquitina que coordena a sinalização a jusante de membros da superfamília de receptores de TNF, de receptores do tipo Toll (TLRs) e de determinados receptores de reconhecimento de padrões. Ao regular a montagem, dependente de ubiquitina, de complexos de sinalização, a TRAF3 modula respostas de interferon tipo I, a atividade de MAPK e a saída da via NF-κB, incluindo a contenção da sinalização NF-κB não canônica por meio do controle da estabilidade de NIK. Essas funções colocam a TRAF3 como um determinante-chave da homeostase imune inata e adaptativa, influenciando a produção de citocinas, a sinalização de receptores de antígeno e decisões de sobrevivência celular. Alterações na expressão ou na função de TRAF3 estão associadas à desregulação imune e foram relatadas em contextos de sinalização ligados a malignidades, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas de inflamação e biologia do câncer.
TRAF3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TRAF3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TRAF3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TRAF3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TRAF3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.