TPMT CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423483

개요

Tpmt는 thiopurine S-메틸트랜스퍼레이스(TPMT)를 암호화하며, TPMT는 세포질에 존재하는 S-아데노실-L-메티오닌(SAM) 의존성 메틸트랜스퍼레이스로서 티오퓨린 및 관련 황 함유 기질의 S-메틸화를 촉매합니다. 마우스 세포에서 TPMT 활성은 외인성 물질과 뉴클레오타이드 유사체의 대사에 기여하여, 세포 내 티오구아닌 뉴클레오타이드 풀을 형성하고 그에 따른 DNA 복제 스트레스 및 손상 신호전달에 영향을 미칩니다. TPMT 기능의 변이는 임상적 적용을 전제로 하지 않고, 티오퓨린 민감도의 결정 요인과 조혈 독성 기전을 연구하기 위한 모델로 널리 활용됩니다. 따라서 Tpmt는 증식 조직에서 약물 생체전환, 산화환원 균형, 그리고 유전체 무결성을 연결하는 경로들과 관련이 있습니다.

TPMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Tpmt 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Tpmt 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Tpmt의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TPMT 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TPMT 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Tpmt 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TPMT 기능에 중요한 Tpmt 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Tpmt 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TPMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 TPMT CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Tpmt 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TPMT HDR 플라스미드 (m) 및 TPMT HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Tpmt 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Tpmt 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.