Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Topo IIβ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400773-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Topo IIβO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Topo IIβ (h) e o Plasmídeo Double Nickase Topo IIβ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TOP2B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Topo IIβ Anticorpo (A-12): sc-365071
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Topo IIβ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400773-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Topo IIβ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400773-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TOP2B codifica a topoisomerase IIβ humana (Topo IIβ), uma enzima dependente de ATP que resolve o superenovelamento do DNA e os catenanos ao gerar quebras transitórias de dupla fita e religar o DNA. A Topo IIβ é importante para a regulação transcricional, a topologia da cromatina e a progressão adequada durante a replicação do DNA e a segregação cromossômica, conectando-a a vias de resposta a danos no DNA e de estabilidade do genoma. Sua atividade se intersecciona com processos como a decatenação de cromátides-irmãs, o alívio do estresse torsional durante a transcrição e a manutenção da estrutura de cromatina de ordem superior. A desregulação da função de TOP2B ou quebras de DNA aberrantes mediadas pela topoisomerase II tem sido associada à instabilidade genômica e a programas de expressão gênica alterados, estudados na biologia do câncer e em modelos de neurodesenvolvimento.
Topo IIβ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TOP2B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TOP2B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TOP2B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TOP2B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.