TMEM125 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414318

概要

TMEM125 は、多回膜貫通型の膜タンパク質をコードしており、膜の構造・配置の制御や細胞内輸送といった過程に関与する可能性が示されつつあります。これらの過程は、受容体のターンオーバーや区画化されたシグナル伝達に影響します。TMEM125 の発現は複数の組織で報告されており、いくつかの疾患データセットでは転写産物レベルの発現異常も観察されています。これらの知見は、ストレス下の細胞恒常性との関連の可能性を示唆します。作用機序に関する注釈はまだ限定的ですが、TMEM125 は、膜近傍の経路、オルガネラ動態、プロテオスタシスに焦点を当てた機能ゲノミクス研究で頻繁に評価されています。こうした特徴から、膜タンパク質がシグナル伝達ネットワークや細胞状態の遷移をどのように形作るかを解明するうえで、TMEM125 は有用な標的となります。

TMEM125 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTMEM125遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TMEM125内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TMEM125のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TMEM125タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TMEM125シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TMEM125欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TMEM125の機能に不可欠なTMEM125エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TMEM125ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TMEM125 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTMEM125 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TMEM125遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TMEM125 HDRプラスミド（h）および TMEM125 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTMEM125ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTMEM125標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。