TMED9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407215

概要

TMED9（p24ファミリーメンバー9）は、初期分泌経路に主として局在するp24/TMEDファミリーのI型膜貫通型カーゴ受容体をコードします。TMED9はCOPIおよびCOPII依存的な小胞輸送に関与し、積荷（カーゴ）の選別と、小胞体（ER）、ER-ゴルジ中間区画（ERGIC）、ゴルジ体間の輸送を支えるとともに、オルガネラの恒常性維持やタンパク質品質管理にも寄与します。これらの役割を通じて、TMED9は膜タンパク質および分泌タンパク質の分泌動態や細胞内分布に影響を与え、ERストレス応答やプロテオスタシスと密接に結び付いた過程に関与します。分泌輸送やER-ゴルジ輸送の破綻は、がんにおける分泌の再構築やストレス適応経路を含む、多様なヒト疾患に関与することが示唆されています。

TMED9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTMED9遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TMED9内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TMED9のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TMED9タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TMED9シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TMED9欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TMED9の機能に不可欠なTMED9エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TMED9ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TMED9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTMED9 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TMED9遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TMED9 HDRプラスミド（h）および TMED9 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTMED9ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTMED9標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。