THP CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423607

개요

Umod는 포유류 소변에서 가장 풍부하게 분비되는 당단백질인 Tamm–Horsfall 단백질(THP, 유로모듈린)을 암호화한다. THP는 헨레고리 굵은 상행각(thick ascending limb)과 초기 원위세뇨관(early distal tubule)의 상피세포에서 생성된다. THP는 세뇨관 내강으로 분비되어 상피 항상성 유지에 기여하고, NKCC2 의존적 NaCl 재흡수와 같은 수송 과정과의 상호작용을 통해 이온 처리(handling)를 조절하며, 중합체 형성을 통해 소변 단백질 네트워크의 구조를 형성하는 데 도움을 준다. 또한 세뇨관 스트레스 반응, 선천면역 신호전달, 상피 분화 프로그램에 대한 영향 등을 통해 UMOD 활성은 신장 생리와 세뇨관-간질 손상에 대한 취약성에 영향을 미친다. Umod의 유전적·기능적 이상은 유로모듈린 연관 신장질환, 고요산혈증 관련 형질, 만성 신장질환 위험 등과 같은 신장 질환 표현형과 연관되어 있어, 마우스 모델에서 기전 연구를 위한 핵심 유전자 좌위로 간주된다.

THP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Umod 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Umod 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Umod의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 THP 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 THP 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Umod 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• THP 기능에 중요한 Umod 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Umod 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• THP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 THP CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Umod 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  THP HDR 플라스미드 (m) 및 THP HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Umod 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Umod 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.