Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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TGase2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423375
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TGase2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TGase2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TGase2 Anticorpo (4G3): sc-73612
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TGase2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423375 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Tgm2** de camundongo codifica a **transglutaminase 2 (TGase2)**, uma enzima multifuncional dependente de **Ca2+** que catalisa a reticulação de proteínas, a desamidação e a poliaminação, além de também apresentar atividades de ligação a GTP e de proteína “scaffold”. A TGase2 regula a remodelação da matriz extracelular, a adesão e migração celular, a apoptose e a sinalização inflamatória, interagindo com vias como **NF-κB**, **TGF-β**, **integrina/FAK** e programas de cicatrização. Sua atividade influencia a dinâmica do citoesqueleto e a rigidez da matriz, conectando o **Tgm2** à remodelação fibrótica e às respostas de reparo tecidual. A desregulação da função da TGase2 tem sido associada, em modelos pré-clínicos, à neuroinflamação, à adaptação ao estresse metabólico e à remodelação do microambiente tumoral, o que motiva estudos mecanísticos em tipos celulares relevantes de camundongo.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TGase2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tgm2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tgm2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tgm2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TGase2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tgm2 para a investigação da sinalização de TGase2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tgm2 críticos para a função TGase2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tgm2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TGase2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TGase2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tgm2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TGase2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TGase2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tgm2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tgm2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.