TET1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-400845

개요

TET1(ten-eleven translocation methylcytosine dioxygenase 1)은 Fe(II)/2-옥소글루타르산 의존성 디옥시게나아제로, 5-메틸시토신(5mC)을 5-하이드록시메틸시토신(5hmC) 및 추가 산화 유도체로 산화시키는 반응을 촉매하여 능동적 DNA 탈메틸화와 후성유전학적 재구성을 뒷받침합니다. 전사 조절 인자 및 크로마틴 관련 복합체와의 상호작용을 통해 TET1은 프로모터와 인핸서의 메틸화 상태를 형성하는 데 기여하며, 이는 세포 정체성, 분화, 유전체 안정성에 영향을 줍니다. TET1과 연관된 5hmC 지형의 변화는 암 및 신경발달 맥락에서 비정상적인 유전자 발현 프로그램과 관련되어 왔고, DNMTs나 IDH 의존성 대사 경로 등 다른 DNA 메틸화 기계와 함께 자주 연구됩니다. 후성유전 ‘작성자/지우개’의 접점으로서 TET1은 메틸화 의존적 신호 네트워크 조절과 계통(라인리지) 특이적 전사를 규명하는 데 널리 활용됩니다.

TET1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 TET1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 TET1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 TET1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 TET1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 TET1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 TET1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• TET1 기능에 중요한 TET1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 TET1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• TET1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 TET1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 TET1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  TET1 HDR 플라스미드 (h) 및 TET1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 TET1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 TET1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.