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TERT慢病毒激活颗粒(h) | sc-400316-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
TERT慢病毒激活颗粒(h2) | sc-400316-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
人TERT基因编码端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase)的催化亚基;端粒酶以RNA为模板延伸端粒DNA重复序列,从而维持染色体末端的完整性。通过维持端粒长度稳态,TERT支持细胞的复制潜能与基因组稳定性,并因此与DNA损伤应答、细胞衰老程序以及细胞永生化相关联。TERT的调控与多种促增殖信号网络交叉,包括MYC和WNT/β-连环蛋白相关的转录控制,以及TERT启动子处的表观遗传染色质状态。TERT异常表达或端粒酶活性升高常与致癌转化有关,同时也与影响组织更新及衰老相关表型的端粒生物学疾病相关。
TERT 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TERT 表达。
TERT 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在TERT转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性TERT表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 TERT 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。