TERT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423341
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TERT O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TERT, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TERT Anticorpo (C-12): sc-377511
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TERT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423341 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Tert codifica a subunidade catalítica da telomerase (TERT), uma transcriptase reversa que alonga as repetições teloméricas para preservar as extremidades dos cromossomos durante a replicação do DNA. Ao manter o comprimento dos telômeros, a TERT sustenta a capacidade proliferativa de longo prazo e influencia a estabilidade do genoma, a senescência replicativa e as respostas celulares ao estresse. A atividade da TERT interage com a sinalização de dano ao DNA e com vias de proteção dos telômeros, incluindo o capeamento das extremidades mediado pelo complexo shelterina e a regulação de checkpoints. A desregulação da função da telomerase é relevante para fenótipos associados ao envelhecimento, para a biologia de células-tronco e para modelos de tumorigenese, nos quais a manutenção dos telômeros impacta a instabilidade cromossômica e o destino celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TERT (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tert em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tert, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tert na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TERT.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tert para a investigação da sinalização de TERT, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tert críticos para a função TERT
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tert para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TERT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TERT Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tert. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TERT Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TERT (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tert para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tert definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.