TBL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-407010

概要

TBL2（transducin beta-like 2）は小胞体（ER）関連タンパク質であり、膜近傍のシグナル伝達やプロテオスタシスに関与するとされ、細胞ストレス応答や翻訳制御を調節する役割が報告されています。ERの恒常性をシグナルネットワークに結び付けることで、TBL2は、折り畳み不全タンパク質の処理、脂質・膜の生物学、適応的ストレス経路が細胞運命の決定に影響する状況において研究されています。ERストレスおよび関連する代謝シグナルの制御異常は炎症性・代謝性の表現型と関連づけられており、そのためTBL2はこれらのプロセスの機序解明研究に有用な標的となります。ヒト細胞モデルでは、TBL2を攪乱することで、栄養ストレス、酸化ストレス、またはプロテオトキシックストレス下において、ERに連結したシグナル伝達ノードが経路出力をどのように規定するかの解析が可能になります。

TBL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTBL2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TBL2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TBL2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TBL2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TBL2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TBL2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TBL2の機能に不可欠なTBL2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TBL2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TBL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTBL2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TBL2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TBL2 HDRプラスミド（h）および TBL2 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTBL2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTBL2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。