TAL2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406836

Übersicht

TAL2 (T‑cell acute lymphocytic leukemia 2) kodiert einen basischen Helix‑Loop‑Helix-Transkriptionsfaktor, der zur Festlegung von Zelllinien und zur Regulation von Genexpressionsprogrammen während der hämatopoetischen Entwicklung beiträgt. TAL2 kann Bestandteil transkriptioneller Komplexe sein, die die Chromatinzugänglichkeit beeinflussen und Entscheidungen zwischen Differenzierung und Proliferation koordinieren, und steht dabei in Wechselwirkung mit umfassenderen, bHLH‑gesteuerten regulatorischen Netzwerken. Eine fehlregulierte TAL2-Expression wurde mit aberranter transkriptioneller Kontrolle in Kontexten der T‑Zell‑Linie in Verbindung gebracht und wird in Modellen der Leukämogenese sowie einer veränderten Entwicklung von Immunzellen untersucht. Als nukleäres Regulationsprotein bietet TAL2 einen gut zugänglichen Ansatzpunkt zur Analyse transkriptioneller Schaltkreise, Zellschicksalsübergänge und onkogener Abhängigkeiten von Transkriptionsfaktoren.

Das TAL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des TAL2-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des TAL2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von TAL2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die TAL2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von TAL2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der TAL2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf TAL2-Exone abzielen, die für die TAL2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere TAL2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom TAL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom TAL2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des TAL2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das TAL2 HDR-Plasmid (h) und TAL2 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von TAL2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten TAL2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.